慢病毒包装系统 vsv

最近，NatureMedicine期刊发表的一项大规模研究显示，成年人接种新冠疫苗与心肌炎风险小幅增加有关，而感染新冠病毒则与心肌炎、心包炎和心律失常风险大幅增加有关。那么，新冠感染导致心肌炎的具体机制是什么？什么人在感染新冠后更容易患心肌炎呢？近日，美国南卡罗莱纳大学医学院TanWenbin团队在预印本平台bioRxiv上发表了研究论文。

新冠病毒是通过其刺突蛋白与人体细胞表面的ACE2受体结合而入侵和感染的。随着新冠大流行的发展，包括心血管症状在内的新冠病毒急性后遗症已成为新的健康威胁。之前的研究显示，与代谢相关的疾病，如糖尿病、心血管疾病、高血压和肥胖等，是导致新冠患者出现严重症状的危险因素。

常用的病毒载体有腺病毒、逆转录病毒和慢病毒。逆转录病毒载体只能感染分裂期细胞，而且容量有限，腺病毒一般不能整合到染色体上，只能进行瞬时感染。与其它逆转录病毒相比，慢病毒（LV）具有可以感染非分裂期细胞、容纳外源性基因片段大，可以长期表达等显著优点。慢病毒不产生任何有效的细胞免疫应答，可作为一种体外基因运输的工具。慢病毒载体介导的转基因表达能持续数月，且无可观察到的病理学现象。

而慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒，需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞，在细胞中进行病毒的包装，包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中，离心取得上清液后，可以直接用于宿主细胞的感染。慢病毒包装系统一般都是三质粒或四质粒包装系统。其中四质粒系统比三质粒系统在生物安全性上更好一些，所以应用较多。

细胞脂质体转染效果差。病毒也被广泛地应用于表达RNAi的研究中，由于有些类型细胞脂质体转染效果差,转移到细胞内的siRNA半衰期短,体外合成siRNA对基因表达的抑制作用通常是短暂的。转染制备慢病毒细胞：慢病毒包装常用人胚肾细胞293T，其含有SV40病毒的大T抗原蛋白编码基因，转染效率极高。但其贴壁性不好，所以需要使用多聚赖氨酸包被的培养皿增加其吸附性。

一、慢病毒包装简介及其用途慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力，慢病毒载体的研究发展得很快，研究的也非常深入。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达，在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，从而达到良好的的基因治疗效果，在美国已经开展了临床研究，效果非常理想，因此具有广阔的应用前景。